L'impianto di condrociti autologhi su membrana collagenica (MACI) è una tecnica di ingegneria tissutale per il trattamento delle lesioni cartilaginee articolari a tutto spessore. Tale metodica prevede la semina di condrociti coltivati su una membrana di collagene tipo I/III, la quale è impiantata nel difetto condrale utilizzando esclusivamente colla di fibrina. Abbiamo analizzato l’evoluzione strutturale e molecolare del MACI dopo l’impianto. L’analisi morfologica è stata eseguita su 3 campioni bioptici, prelevati da 3 differenti pazienti a 2 anni di follow-up, utilizzando metodiche di microscopia luce, immunoistochimica (collagene tipo I e II), SEM e TEM. Per la valutazione biochimica è stata utilizzata la Flurophore Assisted Carbohydrate Electrophoresis (FACE), per l’analisi dell’espressione genica la Quantitative Real Time PCR (QRT-PCR). L’analisi istologica ha mostrato la formazione di un tessuto ialino in tutti i casi, con presenza di collagene tipo II, condroitinsolfato e la formazione del tidemark. In un solo campione si è notato la concomitante positività per il collagene tipo I limitatamente allo strato superficiale. Sono state evidenziate all’esame ultrastrutturale la riorganizzazione del network fibrillare collagenico e la organizzazione in cluster degli elementi cellulari. La FACE ha dimostrato la presenza di glicosaminoglicani con un pattern simile ad un tessuto cartilagineo ialino. La QRT-PCR ha registrato l’espressione del gene collagene tipo II in tutti i campioni. In un solo caso vi era la concomitante espressione del gene collagene tipo I. Lo studio dimostra che la membrana di collagene tipo I/III è un supporto ideale per la crescita di condroblasti i quali, una volta impiantati nel difetto condrale, formano un tessuto simile alla cartilagine ialina.

Impianto di condrociti autologhi: analisi ultrastrutturale, biochimica e dell’espressione genica.

RONGA, MARIO;
2005-01-01

Abstract

L'impianto di condrociti autologhi su membrana collagenica (MACI) è una tecnica di ingegneria tissutale per il trattamento delle lesioni cartilaginee articolari a tutto spessore. Tale metodica prevede la semina di condrociti coltivati su una membrana di collagene tipo I/III, la quale è impiantata nel difetto condrale utilizzando esclusivamente colla di fibrina. Abbiamo analizzato l’evoluzione strutturale e molecolare del MACI dopo l’impianto. L’analisi morfologica è stata eseguita su 3 campioni bioptici, prelevati da 3 differenti pazienti a 2 anni di follow-up, utilizzando metodiche di microscopia luce, immunoistochimica (collagene tipo I e II), SEM e TEM. Per la valutazione biochimica è stata utilizzata la Flurophore Assisted Carbohydrate Electrophoresis (FACE), per l’analisi dell’espressione genica la Quantitative Real Time PCR (QRT-PCR). L’analisi istologica ha mostrato la formazione di un tessuto ialino in tutti i casi, con presenza di collagene tipo II, condroitinsolfato e la formazione del tidemark. In un solo campione si è notato la concomitante positività per il collagene tipo I limitatamente allo strato superficiale. Sono state evidenziate all’esame ultrastrutturale la riorganizzazione del network fibrillare collagenico e la organizzazione in cluster degli elementi cellulari. La FACE ha dimostrato la presenza di glicosaminoglicani con un pattern simile ad un tessuto cartilagineo ialino. La QRT-PCR ha registrato l’espressione del gene collagene tipo II in tutti i campioni. In un solo caso vi era la concomitante espressione del gene collagene tipo I. Lo studio dimostra che la membrana di collagene tipo I/III è un supporto ideale per la crescita di condroblasti i quali, una volta impiantati nel difetto condrale, formano un tessuto simile alla cartilagine ialina.
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